温肾健脾、祛毒活血法对早期糖尿病肾病及IL

一、研究目的观察温肾健脾、祛毒活血法治疗早期DN的临床疗效、对肾功能保护作用以及对炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响，并初步探讨其作用机理。二、研究内容与方法1．临床研究将符合西医早期DN诊断标准且中医辨证符合脾肾阳虚证、气虚血瘀证者58例患者分为治疗组32和对照组26例，两组均采取相同的基础治疗，包括糖尿病健康教育、糖尿病饮食、控制血压、血糖。对照组在基础治疗加服福辛普利(蒙诺)5～10mg，po，qd；治疗组在对照组的基础上加服温肾健脾、祛毒活血法中药，水煎服，逐日1剂，以1个月为一个疗程。观察治疗前后早期DN及中医证候疗效，检测空腹血糖(FBG)，餐后2小时血糖(P2hBG)，血脂，24小时尿蛋白排泄量(UAE)，测定血清IL-6、TNF-α等指标进行比较。2．实验研究将SPF级雄性SD大鼠采用一次性腹腔注射STZ(剂量为60mg／kg)建立早期DN模型。将模型成功的糖尿病大鼠随机分组与正常组共4组：正常组、模型组、西药组、中药组，中药组按生药20g／kg·d灌胃，西药组以福辛普利4mg／kg·d灌胃，正常组及模型组均用等量生理盐水灌胃，实验时间为6周。观察各组大鼠治疗后一般状态、肾重／体重比、血糖、24h尿微量白蛋白、TG、TC、SCr、BUN变化情况；采用ELISA法检测大鼠血清IL-6、TNF-α水平；光镜下观察肾组织形态变化；电镜下观察肾组织超微结构改变；采用免疫组化法观察肾脏转化生长因子(TGF-β_1)表达情况。三、研究结果1．临床研究观察到在血糖控制的基础上，治疗组总有效率为87.5％，明显优于对照组的61.5％(P＜0.05)。两组均能减轻早期DN患者症状积分、降低FBG、P_2hBG、24hUAE及改善血脂各项指标；治疗组在改善早期DN患者临床症状、降低24UAE及改善血脂各项指标等方面均明显优于对照组(P＜0.05或P＜0.01)，且能降低患者血清IL-6、TNF-α水平(P＜0.05或P＜0.01)，对照组炎症指标治疗前后比较差异不明显。未发现任何毒副作用。2．模型组大鼠明显消瘦，饮水较多，小便多，大便溏，精神萎靡，反映迟钝，毛竖无光泽，动作迟缓。肾组织切片，模型组可见多数肾小球体积不同程度增大，肾小球毛细血管腔扩张，可见红细胞淤积，炎症细胞浸润，肾小球系膜区扩张，基底膜不同程度增厚，未见明显的肾小球硬化。3．与正常组相比，模型大鼠体重明显减轻(P＜0.01)，肾重指数、血糖、24小时尿量、UAE、TG、TC以及STZ大鼠血清炎症标志物IL-6及TNF-α含量均明显升高(P＜0.05或P＜0.01)；经治疗后中药、西药组24小时尿量、UAE均有减轻(P＜0.05或P＜0.01)，中药组明显优于西药组(P＜0.05或P＜0.01)。治疗后中药组血糖、TG、TC较模型组下降明显，差异有明显性(P＜0.05或P＜0.01)，西药组则无明显变化(P＞0.05)，表明中药具有一定的降低血糖、调节血脂的作用。各组大鼠SCr、BUN的比较均无统计学意义。此外，中药组IL-6及TNF-α较模型组均有明显降低，差异有明显性(P＜0.05或P＜0.01)，西药组IL-6及TNF-α无明显变化。4．肾脏免疫组化示模型组大鼠肾组织TGF-β_1表达明显增强，以肾小管及肾小球较为明显，西药组及中药组肾组织TGF-β_1表达与模型组相比，程度明显减轻。半定量积分示：早期DN肾组织中TGF-β_1表达与正常组比较明显增加(P＜0.01)；经治疗后中药组有明显抑制肾组织TGF-β_1的表达作用(P＜0.01)，并优于西药组(P＜0.05)。四、结论1．阳气易虚，阳虚亦可致消；脾肾阳(气)虚是早期DN的发病基础，内生邪毒是早期DN的重要因素，早期DN病机为脾肾阳(气)虚，邪毒内阻，故以温肾健脾、祛毒活血为早期DN基本治法。2．温肾健脾、祛毒活血法中药复方可减轻早期DN患者临床症状，降低尿微量白蛋白，具有较好的治疗保护作用。3．温肾健脾、祛毒活血法中药复方对早期DN大鼠具有一定降低血糖、改善血脂代谢紊乱、降低尿微量白蛋白的作用；并可减轻DN大鼠肾组织病理损害伤，抑制肾脏肥大，系膜增生及肾小球基底膜增厚；明显抑制肾组织TGF-β_1的高表达，具有一定的保护肾功能的作用。4．温肾健脾、祛毒活血中药复方能明显下调血清IL-6、TNF-α水平，其治疗早期DN的作用机理可能与调节炎症因子的产生、抑制炎症反应过程有关，通过神经—内分泌—免疫调节网络对机体进行全面的调节，阻断炎症因子TNF-α、IL-6及其受体等，抑制炎症反应，从而调节多种生长因子及细胞粘附分子的表达，纠正内皮功能紊乱，并抑制肾小球系膜的增殖和细胞外基质的产生。【关键词】：早期糖尿病肾病温肾健脾、祛毒活血法炎症因子白介素-6肿瘤坏死因子-a
【论文提纲】：摘要3-5Abstract5-10引言10-12第一部分文献研究12-35一、西医学关于糖尿病肾病的发病机制熟悉12-171生化代谢紊乱12-132肾小球的血活动|教育教学论文|力学改变133各种细胞因子及生长因子13-154遗传背景因素155其他15-17二、中医学对糖尿病肾病的熟悉17-201古代医家对DN的熟悉17-182DN的病因病机研究18-20三、中医药防治早期糖尿病肾病的临床及机理研究近况20-271中医药防治早期DN的临床研究概况20-232中医药防治DN的机理研究近况23-273评述与展望27四、参考文献27-35第二部分临床研究35-45一、临床资料35-36二、研究方法36-401诊断标准362纳入病例标准36-373排除病例标准374治疗方案37-385疗效判定标准38-396统计学方法39-40三、结果40-441两组临床疗效比较40-412两组临床症状积分比较413两组治疗前后FBG、P_2hBG及24hUAE比较41-424两组治疗前后血脂变化比较42-435两组治疗前后IL-6及TNF-α测定结果比较436不良反应43-44四、参考文献44-45第三部分实验研究45-56一、实验材料45-461实验动物452主要药品及试剂45-463主要仪器46二、实验方法46-511糖尿病肾病大鼠模型的制作46-472实验动物分组及给药方法473观察指标及检测方法47-514统计学处理51三、结果与分析51-551一般状况512常规生化指标结果51-533大鼠血清IL-6、TNF-α的变化53-544肾脏病理组织学及超微结构变化54-555肾脏TGF-β_1免疫组化结果55四、参考文献55-56第四部分讨论56-71一、DN的炎症发病机制56-581DN炎症发病机制的提出56-572炎症在DN过程中的损伤作用及抗炎治疗57-58二、早期DN的中医病机探讨58-621阳气易虚,阳虚致消592脾肾阳(气)虚是早期DN的发病基础59-603内生邪毒是早期DN的重要因素60-62三、温肾健脾、祛毒活血法及其组方治疗早期DN的依据62-63四、温肾健脾、祛毒活血法对早期DN的保护作用63-65五、温肾健脾、祛毒活血法对早期DN血清IL-6、TNF-α的干涉作用65-67六、参考文献67-71结语71-73附录73-80附录1:相关英文缩写词73-74附录2:临床研究观察表74-76附录3:光镜下不同组别大鼠肾脏组织形态图76-77附录4:电镜下不同组别大鼠肾脏组织形态图77-78附录5:大鼠肾脏TGF-β_1免疫组化图78-79附录6:攻读博士学位期间发表论文及论著79-80致谢80